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重組蛋白分離純化一般分為三種:含標(biāo)簽的重組蛋白純化、不含標(biāo)簽的重組蛋白純化以及包涵體變性與復(fù)性純化。
含標(biāo)簽的重組蛋白純化:組氨酸標(biāo)簽(His-tag)是使用范圍較為廣泛的一種蛋白純化標(biāo)簽,其純化的原理是組氨酸殘基上的咪唑基團(tuán)可與層析介質(zhì)中的金屬離子螯合,再通過(guò)提高緩沖液中咪唑濃度進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性洗脫達(dá)到純化效果,這種純化標(biāo)簽的有點(diǎn)在于His-Tag的分子質(zhì)量非常小且?guī)缀醪粫?huì)對(duì)目的蛋白本身的生物學(xué)功能及特性產(chǎn)生影響,因此帶有His-Tag的蛋白純化后可直接作為抗原免疫動(dòng)物制備抗體并不會(huì)影響抗體的特異性。佰泉生物還提供其他多種類型標(biāo)簽的蛋白純化服務(wù),如GST-Tag、SUMO-Tag、MBP-Tag等。
佰泉多年來(lái)致力于重組蛋白表達(dá)與純化的相關(guān)研究,每年可完成上百組蛋白的表達(dá)與純化服務(wù),擁有完整的蛋白純化體系,可根據(jù)客戶的不同需求提供多元化的蛋白純化方案。我們可為您提供定制的蛋白純化服務(wù)包括,有/無(wú)標(biāo)簽重組蛋白,天然蛋白的純化分離等。根據(jù)蛋白性質(zhì)設(shè)計(jì)親和純化、離子交換、分子篩、疏水等多種蛋白純化實(shí)驗(yàn)方案,獲得的高純度蛋白質(zhì),可根據(jù)客戶需求一對(duì)一進(jìn)行個(gè)性化方案定制,能夠滿足蛋白質(zhì)折疊、重結(jié)晶等一系列精細(xì)實(shí)驗(yàn)要求。
不含標(biāo)簽的重組蛋白純化:不含純化標(biāo)簽的重組蛋白我們會(huì)根據(jù)客戶的樣品及需求定制方案,一般會(huì)采用抗體親和純化方法,利用靶向配體能與目的蛋白特異性結(jié)合的特性將目的蛋白分離出來(lái);原位雜交儀或選用分子篩進(jìn)行分離純化。
包涵體變性與復(fù)性純化:熒光原位雜交儀將以包涵體形式存在的蛋白進(jìn)行變復(fù)性操作,根據(jù)蛋白質(zhì)不同的性質(zhì),可以選擇尿素、鹽酸胍、去垢劑、極端pH等,以保證至大程度獲得單體狀態(tài)的變性蛋白。