熒光原位雜交儀在疾病檢測(cè)中的應(yīng)用

熒光原位雜交是一種研究亞細(xì)胞水平的RNA分子空間分布的強(qiáng)大方法，同時(shí)也是細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的基本技術(shù)方法。在這種技術(shù)中，首先固定細(xì)胞中的目標(biāo)RNA，然后與核苷酸標(biāo)記互補(bǔ)探針進(jìn)行雜交，然后通過(guò)免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行，所以特定的原位雜交技術(shù)可以應(yīng)用于病理研究中福爾馬林固定或石蠟包埋組織以及冰凍切片中熒光原位雜交的檢測(cè)。因能進(jìn)行定性、半定量及定位分析，在異質(zhì)性明顯的組織標(biāo)本中，原位雜交技術(shù)不僅具有較其他常規(guī)miRNA分析方法操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低廉等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)由于miRNA具有不易降解而在石蠟包埋組織中長(zhǎng)期穩(wěn)定存在的特性，使得熒光原位雜交技術(shù)在臨床科研中的應(yīng)用受到越來(lái)越多的關(guān)注。

熒光原位雜交儀在疾病檢測(cè)中的應(yīng)用：

miRNA與腫瘤的發(fā)生、診斷、治療和預(yù)后等有著密切關(guān)系。腫瘤中超過(guò)50% 的miRNAs 基因位于染色體脆性位點(diǎn)或染色體擴(kuò)增、缺失或轉(zhuǎn)位區(qū)域。相比于蛋白質(zhì)標(biāo)志物，miRNA表達(dá)異常出現(xiàn)的更早，對(duì)早期診斷更加有利，也更適合作為作為腫瘤診斷標(biāo)志物。用熒光原位雜交儀測(cè)量miRNA可以顯示單個(gè)細(xì)胞內(nèi)miRNA的表達(dá)，從而提供了描述不同病理細(xì)胞中miRNA表達(dá)水平的方法。因此miRNA熒光原位雜交主要用于病理的輔助診斷及鑒別診斷、疾病預(yù)后評(píng)估和指導(dǎo)臨床靶向治療等。

例如，一些黑色素細(xì)胞腫瘤在組織學(xué)上可能不明確，導(dǎo)致診斷困難，這可能導(dǎo)致良性病變的過(guò)度治療和不必要的心理困擾或惡性腫瘤治療不足。黑色素瘤中miR-211的表達(dá)明顯降低可以準(zhǔn)確區(qū)分惡性腫瘤和良性腫瘤。研究人員通過(guò)熒光和顯色miRNA原位雜交證實(shí)，與痣相比，miR-211在黑色素瘤中的表達(dá)降低。此外，這些數(shù)據(jù)也支持miR-211在具有Spitz形態(tài)的發(fā)育異常痣和黑素細(xì)胞腫瘤中的診斷價(jià)值，表明miRNA原位雜交可作為一種新穎的簡(jiǎn)單輔助檢測(cè)。