東莞供應(yīng)病理診斷廠家
發(fā)布時間:2022-10-28 01:07:46東莞供應(yīng)病理診斷廠家
熒光原位雜交儀是利用熒光探針與染色體結(jié)合,并且結(jié)合部分的序列顯示出高度的互補性。熒光探針與染色體結(jié)合的部分通常使用熒光顯微鏡觀察。FISH為研究人員提供了一種新的來可視化或繪制單個細(xì)胞中的遺傳物質(zhì),包括特定基因或基因的一部分的方法。它是了解各種染色體異常和其他基因突變的重要工具。與用于染色體研究的大多數(shù)其他技術(shù)不同,F(xiàn)ISH不需要對活躍分裂的細(xì)胞進(jìn)行,這使其成為一種非常通用的程序。
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熒光原位雜交儀的探針有DNA探針和RNA探針,可對動物組織和植物組織中核酸進(jìn)行檢測,特異性較高。雜交所用的探針大致可以分為三類:(1)染色體特異重復(fù)序列探針;(2)全染色體或染色體區(qū)域特異性探針;(3)原位雜交儀特異性位置探針,由一個或幾個克隆序列組成。探針的熒光素標(biāo)記可以采用直接和間接標(biāo)記的方法。間接標(biāo)記是采用生物系標(biāo)記的dUTP經(jīng)過缺口平移法進(jìn)行標(biāo)記;而直接標(biāo)記法是將熒光素直接與探針核苷酸蔌磷酸戊糖骨架共價結(jié)合,或在缺口平移法標(biāo)記探針時將熒光素核苷三磷酸摻入。
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熒光原位雜交儀中抗體純化—Protein A/G親和純化:Protein A是一種分離自金黃色釀膿葡萄球菌的細(xì)胞壁蛋白,通過Fc區(qū)與哺乳動物的IgG結(jié)合。Protein A可用于分離和純化IgG及其亞類與片段。Protein A 瓊脂糖柱適合于免疫沉淀鼠IgG2a, IgG2b, IgA, human IgG1, IgG2IgG4。Protein G是一種分離自G 型鏈球菌的細(xì)胞壁蛋白,通過Fc區(qū)與哺乳動物的IgG結(jié)合。與Protein A Agrose相比對IgG具有更好的結(jié)合能力。Protein G Agarose適合于免疫沉淀鼠 IgG1,IgG2a, IgG2b, IgG3, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, 兔子和羊多克隆抗體, 以及人 IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。
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