山西定制FISH廠家
發(fā)布時(shí)間:2022-10-18 01:07:42山西定制FISH廠家
哺乳動物蛋白表達(dá)系統(tǒng)適用于科學(xué)家對天然構(gòu)象蛋白的體外重組表達(dá)需求,如糖基化修飾,磷酸化修飾等;利用哺乳動物蛋白表達(dá)系統(tǒng),經(jīng)過高密度發(fā)酵技術(shù)培養(yǎng),佰泉生物的熒光原位雜交儀科學(xué)家可以做到高達(dá)6.3g/L表達(dá)水平的重組抗體發(fā)酵,適合于重組單抗藥物的高水平表達(dá)發(fā)酵。我們的細(xì)胞發(fā)酵培養(yǎng)人員均經(jīng)過嚴(yán)格的GMP體系培訓(xùn)和質(zhì)量控制體系培訓(xùn),可為客戶提供可追溯的蛋白表達(dá)與制備文件記錄。對于3-10L的貼壁哺乳動物細(xì)胞發(fā)酵規(guī)模,我們可以直接利用一次性細(xì)胞發(fā)酵工廠進(jìn)行細(xì)胞發(fā)酵。
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StatSpinTermoBrite原位雜交儀可根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的設(shè)計(jì),在玻片上一步完成原位雜交(FISH)中變性和雜交兩個(gè)過程,而且能嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和環(huán)境濕度,在保證實(shí)驗(yàn)的成功率和重復(fù)率的基礎(chǔ)上極大地提高實(shí)驗(yàn)效率。ThermoBrite采用微電腦控溫,程序化變性/雜交步驟,使用方便。在獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果同時(shí),大大縮短了手工操作時(shí)間。變性/雜交在內(nèi)連續(xù)完成,縮短手工操作時(shí)間50%以上,減少有害溶液的用量,控溫精準(zhǔn),無須玻片裝滿,每次可以操作12個(gè)樣本,玻片放置/取出方便。
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大腸桿菌(E.coli)重組蛋白表達(dá)技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展,全自動原位雜交儀已經(jīng)變得日趨成熟。但想要在大腸桿菌表達(dá)體系獲得較高水平的可溶性以及高產(chǎn)量的蛋白表達(dá),尤其是針對大分子蛋白和某些藥物類蛋白,一個(gè)優(yōu)質(zhì)的表達(dá)策略必不可少??蛻糁恍枰峁┪覀円欢蔚鞍仔蛄?,CDS或蛋白名稱,我們富有經(jīng)驗(yàn)的科學(xué)家均可以為您在較短的時(shí)間內(nèi)制定一個(gè)完整的蛋白表達(dá)和純化方案。常見的小分子(分子量<10 kDa)蛋白類藥物,如Leptin,利拉魯肽,EGF等在原核表達(dá)過程中以親和標(biāo)簽+融合蛋白形式進(jìn)行表達(dá),發(fā)酵和純化。
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為了溶液中抗原抗體親和力檢測的親和常數(shù)的真實(shí)性,全自動原位雜交儀必須嚴(yán)格要求實(shí)驗(yàn)條件以避免親和值偏差低估十倍。首先,使用單價(jià)抗體片段(Fab 或 scFv),可以調(diào)整二價(jià)片段的數(shù)學(xué)計(jì)算,但前提是抗原每個(gè)分子包含單個(gè)結(jié)合位點(diǎn)。然而,隨著抗體工程的出現(xiàn),現(xiàn)在很容易在大腸桿菌中產(chǎn)生這樣的片段。其次,為了準(zhǔn)確測量游離抗體濃度,ELISA不應(yīng)顯著改變液相平衡。這需要進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)以確定正確的實(shí)驗(yàn)條件。后,建議使用曲線擬合程序來避免方程線性化引入的偏差,例如Scatchard 變換。
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首先,成功率!原位雜交儀可以大大提高您實(shí)驗(yàn)的成功率。全程由機(jī)器程序控制的變性、復(fù)性過程避免了手工操作過程中的不確定性,同時(shí)也避免了甲酰胺、水浴鍋等因素造成的影響。一次FISH實(shí)驗(yàn)僅探針便價(jià)值逾千元,如果因?yàn)椴僮魇д`而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果作廢,損失相當(dāng)慘重。若干次實(shí)驗(yàn)失誤的損失便足以購買一臺雜交儀了。其次,效率!原位雜交儀可大大增進(jìn)您工作的效率,一臺ThermoBrite雜交儀可同時(shí)進(jìn)行12個(gè)樣本的雜交工作,試想,如果您要同時(shí)手工操作12個(gè)樣本的變性、梯度脫水,干燥、加探針、預(yù)熱雜交盒、雜交的過程,是一件多么繁瑣且耗時(shí)的工作!
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熒光原位雜交儀中抗體純化—Protein A/G親和純化:Protein A是一種分離自金黃色釀膿葡萄球菌的細(xì)胞壁蛋白,通過Fc區(qū)與哺乳動物的IgG結(jié)合。Protein A可用于分離和純化IgG及其亞類與片段。Protein A 瓊脂糖柱適合于免疫沉淀鼠IgG2a, IgG2b, IgA, human IgG1, IgG2IgG4。Protein G是一種分離自G 型鏈球菌的細(xì)胞壁蛋白,通過Fc區(qū)與哺乳動物的IgG結(jié)合。與Protein A Agrose相比對IgG具有更好的結(jié)合能力。Protein G Agarose適合于免疫沉淀鼠 IgG1,IgG2a, IgG2b, IgG3, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, 兔子和羊多克隆抗體, 以及人 IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。