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為了溶液中抗原抗體親和力檢測的親和常數(shù)的真實性，全自動原位雜交儀必須嚴格要求實驗條件以避免親和值偏差低估十倍。首先，使用單價抗體片段（Fab 或 scFv），可以調(diào)整二價片段的數(shù)學計算，但前提是抗原每個分子包含單個結(jié)合位點。然而，隨著抗體工程的出現(xiàn)，現(xiàn)在很容易在大腸桿菌中產(chǎn)生這樣的片段。其次，為了準確測量游離抗體濃度，ELISA不應顯著改變液相平衡。這需要進行初步實驗以確定正確的實驗條件。后，建議使用曲線擬合程序來避免方程線性化引入的偏差，例如Scatchard 變換。

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熒光原位雜交儀中抗體純化—Protein A/G親和純化：Protein A是一種分離自金黃色釀膿葡萄球菌的細胞壁蛋白，通過Fc區(qū)與哺乳動物的IgG結(jié)合。Protein A可用于分離和純化IgG及其亞類與片段。Protein A 瓊脂糖柱適合于免疫沉淀鼠IgG2a, IgG2b, IgA, human IgG1, IgG2IgG4。Protein G是一種分離自G 型鏈球菌的細胞壁蛋白，通過Fc區(qū)與哺乳動物的IgG結(jié)合。與Protein A Agrose相比對IgG具有更好的結(jié)合能力。Protein G Agarose適合于免疫沉淀鼠 IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, 兔子和羊多克隆抗體, 以及人 IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。

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首先，成功率！原位雜交儀可以大大提高您實驗的成功率。全程由機器程序控制的變性、復性過程避免了手工操作過程中的不確定性，同時也避免了甲酰胺、水浴鍋等因素造成的影響。一次FISH實驗僅探針便價值逾千元，如果因為操作失誤而導致實驗結(jié)果作廢，損失相當慘重。若干次實驗失誤的損失便足以購買一臺雜交儀了。其次，效率！原位雜交儀可大大增進您工作的效率，一臺ThermoBrite雜交儀可同時進行12個樣本的雜交工作，試想，如果您要同時手工操作12個樣本的變性、梯度脫水，干燥、加探針、預熱雜交盒、雜交的過程，是一件多么繁瑣且耗時的工作！

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熒光原位雜交儀的探針有DNA探針和RNA探針，可對動物組織和植物組織中核酸進行檢測，特異性較高。雜交所用的探針大致可以分為三類：（1）染色體特異重復序列探針；（2）全染色體或染色體區(qū)域特異性探針；（3）原位雜交儀特異性位置探針，由一個或幾個克隆序列組成。探針的熒光素標記可以采用直接和間接標記的方法。間接標記是采用生物系標記的dUTP經(jīng)過缺口平移法進行標記；而直接標記法是將熒光素直接與探針核苷酸蔌磷酸戊糖骨架共價結(jié)合，或在缺口平移法標記探針時將熒光素核苷三磷酸摻入。

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大腸桿菌（E.coli）重組蛋白表達技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展，全自動原位雜交儀已經(jīng)變得日趨成熟。但想要在大腸桿菌表達體系獲得較高水平的可溶性以及高產(chǎn)量的蛋白表達，尤其是針對大分子蛋白和某些藥物類蛋白，一個優(yōu)質(zhì)的表達策略必不可少。客戶只需要提供我們一段蛋白序列，CDS或蛋白名稱，我們富有經(jīng)驗的科學家均可以為您在較短的時間內(nèi)制定一個完整的蛋白表達和純化方案。常見的小分子（分子量<10 kDa）蛋白類藥物，如Leptin，利拉魯肽，EGF等在原核表達過程中以親和標簽+融合蛋白形式進行表達，發(fā)酵和純化。